把目的基因连接到质粒上构建重组质粒时该如何选择限制性内切酶?引物如何设计?质粒酶切位点有BamHI,EcoRI,HindIII,Pstl,Smal,Xbal,Xhoi,目的基因上有BamHI,BgII,Smal,Xmal 等,重组时该选哪个限制性内切酶

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/02 02:14:45
把目的基因连接到质粒上构建重组质粒时该如何选择限制性内切酶?引物如何设计?质粒酶切位点有BamHI,EcoRI,HindIII,Pstl,Smal,Xbal,Xhoi,目的基因上有BamHI,BgII,Smal,Xmal 等,重组时该选哪个限制性内切酶

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把目的基因连接到质粒上构建重组质粒时该如何选择限制性内切酶?引物如何设计?
质粒酶切位点有BamHI,EcoRI,HindIII,Pstl,Smal,Xbal,Xhoi,目的基因上有BamHI,BgII,Smal,Xmal 等,重组时该选哪个限制性内切酶?怎么设计引物引物?

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重组时选择你的目的基因上没有,而质粒的多克隆位点上有的酶切位点,一般重组质粒需要两个酶,所以你要选择两个酶切位点,注意尽量避免使用切出平末端的酶.重组引物设计时首先你要确定你选择的两个酶在的酶切位点在质粒的多克隆位点上的排列顺序,这个不能错,不然序列就会接反.一般设计重组引物的时候,在上游引物5’端前面加上载体多克隆位点排列在前面的酶切位点序列,在下游引物5‘端前面则加上后面的一个酶切位点,酶切位点加好后,注意5’端还需要加上保护碱基,这个具体你可以去查下内切酶的说明书.然后你要注意,根据你的载体需要,是否要在引物上带上启动子和终止子.

限制性内切酶是切开特定序列切开后进行基因重组重组完以后通过DNA连接酶来连接限制性内切酶用于提取目的基因 此题说法是错误的重组质粒构建一般是将工程

把目的基因连接到质粒上构建重组质粒时该如何选择限制性内切酶?引物如何设计?质粒酶切位点有BamHI,EcoRI,HindIII,Pstl,Smal,Xbal,Xhoi,目的基因上有BamHI,BgII,Smal,Xmal 等,重组时该选哪个限制性内切酶 质粒与目的基因构建的重组质粒在受体细胞中有哪两种存在形式 如果我把目的基因连接到质粒载体上,这个载体质粒又有多个启动子,我怎么知道它用那个启动的呢 我想问一个问题,我将一个目的基因连接到质粒上 我想将这个质粒连同目的基因,一块扩增很多个用什么方法. TA克隆构建IL24基因重组质粒 目的基因是从哪里获取的?构建重组质粒的方法是什么呢 质粒与目的基因连接得到几种重组质粒 如何将目的基因和质粒结合成重组质粒 重组质粒构建 一个DNA为什么要接入两个不同的载体?重组质粒构建方法将从荧光假单胞菌2P24基因组中克隆的phlD基因与载体pMDl8一T相连,构建重组质粒pMDl8一T::phlD,并将该质粒上的phlD切下与 如果导入的是质粒而非重组质粒,那么受体细胞中都含有标记基因,那怎样筛选出带目的基因的细胞如质粒A上有抗四环素的标志基因,我们把目的基因跟质粒A重组成重组质粒.再把它导入到不含 关于含目的基因受体的筛选的问题将切割后的质粒和目的基因片段混合,会出现三种情况:质粒自连,目的基因自连,质粒和目的基因连在一起,而利用质粒上的标记基因如四环素的抗性基因进行 质粒构建的过程中,如果是想把α基因与A质粒重组,但为什么要先与一个B质粒先重组再构建呢?就算这个可能是鉴定α基因是不是被正确提取,但是为什么与B质粒重组的重组质粒不能鉴定基因是 如何使目的基因连接到质粒载体上,目的基因怎么获得呢?如果我要一种细胞因子的基因,怎样才能得到呢?应该选择什么样的质粒载体呢? 质粒和目的基因的问题(急)质粒被限制酶切了一个切口,而目的基因也用相同限制酶从DNA上切下.用DNA连接酶连接时,得到的重组产物中的质粒和质粒的结合,指的是一个质粒上两个粘性末端的 目的基因是指重组质粒吗书上判断题 使用农杆菌转换法时如何将目的基因插入到Ti质粒中的T-DNA上?是通过同源重组吗?重组质粒中的目的基因是如何插入进Ti质粒的这点希望有详解……导入受体细胞的质粒不整合进宿主细胞的染 目的基因能否在质粒上 设计一个实验流程,把下面的目标基因重组转化到大肠杆菌中进行表达要求包括:质粒DNA抽提,限制性内切酶酶切,目的DNA片段分离、纯化,载体构建,重组DNA转化等主要步骤 在构建基因表达载体时候,怎么利用选择培养基鉴别是质粒—质粒,目的基因—目的基因,还是质粒—目的基因