PeproTech公司的重组人细胞因子IFN-γ 20ug 我看相关参考文献上写的是单位是U/ml.不知道要如何换算,产品说明书上是这么写的,Biological activity:The ED50 was determined by a viral resistance assay is =2*10^7 units

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/30 14:51:49
PeproTech公司的重组人细胞因子IFN-γ 20ug 我看相关参考文献上写的是单位是U/ml.不知道要如何换算,产品说明书上是这么写的,Biological activity:The ED50 was determined by a viral resistance assay is =2*10^7 units

PeproTech公司的重组人细胞因子IFN-γ 20ug 我看相关参考文献上写的是单位是U/ml.不知道要如何换算,产品说明书上是这么写的,Biological activity:The ED50 was determined by a viral resistance assay is =2*10^7 units
PeproTech公司的重组人细胞因子IFN-γ 20ug 我看相关参考文献上写的是单位是U/ml.不知道要如何换算,
产品说明书上是这么写的,
Biological activity:The ED50 was determined by a viral resistance assay is =2*10^7 units/mg.
公司主页上边是这么写的,
Biological Activity :
Determined by its ability to induce apoptosis in HeLa cells.The expected ED50 for this effect is 5.0-10.0 ng/ml
我现在需要的浓度是500U/ml,要稀释成多少毫升才合适呢?
现在货已到,就是不敢去做随便稀释!

PeproTech公司的重组人细胞因子IFN-γ 20ug 我看相关参考文献上写的是单位是U/ml.不知道要如何换算,产品说明书上是这么写的,Biological activity:The ED50 was determined by a viral resistance assay is =2*10^7 units
曾经看到过人的IFN-Y单位和浓度的关系1200U/ml=40ng/ml,但不知对你买的是否适用,不放心的话就自己测一下吧,或者查查用你同样东西的文献!
干扰素的一般特性:比活性:指每毫克蛋白中所含干扰素的活性单位.活性单位:国内标准是指在人羊膜传代细胞(WISH)被疱疹病毒进攻时,能保护一半的细胞不被攻击的干扰素稀释度的倒数.例如,将干扰素稀释到300万分之一的浓度时,它能使试验所用的人羊膜传代细胞中有一半没有被疱疹病毒所杀灭,此时所用干扰素的活性为300万单位.
干扰素(IFN)生物学活性检测
干扰素(IFN)根据其产生细胞不同和理化性质、犐z物学特性的差异可分为α干扰素(IFN-α)、β干扰素(IFN-β)和γ-干扰素(IFN-γ).它们在机体免疫调节、抗病毒感染中具有重要作用.检测IFN的方法主要分为定量测定(常用ELISA)和生物学活性的检测,后者较为常用.
(一)原理
干扰素能刺激某些指示细胞(如人羊膜上皮细胞Wish株、人喉癌细胞株Hep-2以及人胚肌皮或肺单层细胞)产生抗病毒蛋白,从而使细胞免受水疱性口炎病毒(VSV)的攻击,根据待测样品不同稀释度的保护能力,计算出干扰素生物学活性单位.
(二) 操作步骤
96孔培养板中加入不同稀释度的IFN和标准IFN,
每个稀释度设3孔,每孔50μl,病毒对照不加IFN

每孔加入100μl 1.2×105/ ml Wish
或Hep-2细胞悬液,37℃、CO?孵箱培养6~12h,
使细胞贴壁为单层

每孔加入50μl含100个 TCID50 VSV,
细胞对照不加病毒液

根据细胞病变状态,终止培养前3~4h
加入5mg/ml MTT,15μL/孔

加入适量生理盐水,用滴管轻轻吹吸
弃去悬浮病变细胞和死细胞

200μl/孔 二甲亚砜(DMSO),作用10min

测OD(570nm),表示活细胞中含甲 的量,
也可用刚果红摄入法、结晶紫染色法
测定IFN对活细胞的保护水平
计算:
以保护半数(50%)细胞免受病毒损害的最高干扰素稀释度为1个干扰素活性单位.也可从标准曲线中求得待测样品的IFN活性单位.
(三) 试剂和器材
1.VSV
2.WISH、HeP-2细胞株或人胚肌皮或肺单层培养物.
3.MTT[3-(4,5二甲噻唑-2-yl)-2,5-2苯基-四唑溴盐],二甲亚砜(DMSO),刚果红,结晶紫等.
4.10%FCS RPMI1640,培养板、培养瓶、CO?孵箱、超净台、酶联检测仪.
(四) 注意事项
1.实验时先加IFN,后加指示细胞,以使细胞均匀分布于培养板底部.
2.本法对天然培养上清或重组IFN-α、IFN-β和IFN-γ均可检测其活性单位.

生物活性:ED50为确定的是由病毒性分析<= 0.05ng/ml,相应的比活度> = 2 * 10 ^ 7个单位/毫克。
其为2 * 10 ^ 7个单位/毫克*0.05ng/ml=1000U/ml
生物活性:能力取决于其诱导细胞凋亡在HeLa。此产生预期效果的ED50为5.0-10.0纳克/毫升
你现在需要的是500U/ml,固你要将你的样品稀释一倍即可了...

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生物活性:ED50为确定的是由病毒性分析<= 0.05ng/ml,相应的比活度> = 2 * 10 ^ 7个单位/毫克。
其为2 * 10 ^ 7个单位/毫克*0.05ng/ml=1000U/ml
生物活性:能力取决于其诱导细胞凋亡在HeLa。此产生预期效果的ED50为5.0-10.0纳克/毫升
你现在需要的是500U/ml,固你要将你的样品稀释一倍即可了

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