转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 03:56:17
转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒?

转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒?
转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒?

转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒?
这个问题可以从几外方面着用排查,一个,氨苄是否失效?失一个厂家的或者批次的试一下.
细菌是否产生抗性?我不加质粒,直接用感受态涂板,看是否能长出来.
质粒提取是否出问题了?挑起菌落,去摇菌,而不是用菌落去提质粒.
最后,你是如何知道没有质粒的?电泳检测还是PCR检测?如果电泳检测,可能是质粒含量太低,检测不出来(可以将提出来的质粒重新转化一次,这样会比连接产物的效率高).如果是PCR检测,一个是PCR系统是否正常?另一个,是否提出来的质粒并不是我们克隆进去的质粒(感受态细胞受到质粒污染了).

转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒? 大肠杆菌里面有质粒吗?如果大肠杆菌有质粒的话,那做转化的感受态细胞里有没有质粒啊?如果有质粒是不是也有抗性基因?那蓝白筛选还有意义吗? 转化子为什么在LB液体培养基上培养不出来用PBI121与我的目的片断酶切连接构建植物表达载体,连接后使用DH5α做的感受态转化,长出转化子,但是挑单克隆到具相应抗性的LB液体培养基上培养却 切开的质粒能转化进入感受态细菌吗 感受态细菌转化时需要多大的质粒浓度? 一个感受态细胞能转化进去多少质粒?最近连续提取的两次质粒都达不到要求,菌量很多,但是最后提出来的质粒很少,是不是因为转化进去的质粒太少了? DNA转化(转入感受态)以后用有抗性的培养基涂板还是无抗性的 质粒转化:取两百微升感受态去转化十微升的连接产物,比例可以吗? 根瘤农杆菌感受态制作时污染是怎么回事?转化质粒进去后,长出后是白色不透明的菌落,都不像是农杆菌. 谁做过酶切质粒的实验啊,制感受态细胞然后转化呢? 为什么我直接将抗氨苄的质粒转化到感受态BL21中竟然不长菌 为什么我直接将抗氨苄的质粒转化到感受态BL21中竟然不长菌 质粒DNA转化大肠杆菌感受态细胞再热激以后进行活化培养,这时培养基为什么不加入抗生素 质粒DNA转化大肠杆菌感受态细胞再热激以后进行活化培养,这时培养基为什么不加入抗生素 32a质粒转化BL21,涂氨苄抗性板有菌落,检测不出目的条带,请问如何解决这个问题? 大肠杆菌感受态制备时为什么用无抗性的培养基? 标记基因如何筛选?抗性的基因不本来就在质粒上吗? 甘油20%保甘油菌,提质粒,一直OK,但这几天发现培养菌后,菌量很多,但抽提无质粒,抗性也加了,求指教加了AMP抗性,同一批保存的菌种,有的可以,有的就提不出来质粒,