质粒提出来后,电泳只有一条比较粗的带,为何?酶切后全是拖行带,

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 20:41:27
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质粒抽提过程中由于物理机械作用,跑胶后应该有三种构型,跑的最快的是超螺旋构象;其次是线性,相当于你用限制性内切酶单酶切把质粒切成一条线性的带;最慢的是开环构型,就是双链中的每条单链上在不同的位置有缺口,但缺口不同时出现在两条链的同一碱基处.一般来说,抽螺旋的构象最浓,其他两个构象看不见是正常的.至于你酶切以后形成弥散的带,原因很多,最常见的是因为你抽提质粒的时候蛋白除的不干净,有其他蛋白酶的干扰;或者抽提过程中有机物除的不干净,比如苯酚或乙醇、异戊醇等,造成了内切酶的星星活性;还有可能是你酶加多了,酶切体系里面甘油浓度太高……这个问题我导师编的书里都有写,他讲课的时候有学生讨论质粒构象在跑胶时那个最快哪个最慢的问题,还要我做了实验验证的,希望你看了之后有所帮助,祝实验顺利.

应该是2条靠的很近的条带,一个是紧密型,一个是开放型。
比较粗,可能是因为你的胶浓度偏低,或者质量不是很好导致分辨率不好。酶切后拖带,更加提示是胶的质量不好。建议换用高质量的胶

质粒提出来后,电泳只有一条比较粗的带,为何?酶切后全是拖行带, 请问我用菌液电泳检验克隆是否是阳性的时候,为什么只有一条DH5a的基因组带,而没有质粒条带 如果质粒DNA(假定提取的质粒DNA只有超螺旋一种结构)酶切电泳后,在琼脂糖凝胶上若出现以下情况,是什么原因1.没有带 2.一条带 3.两条带 4.三条带 sds-page电泳出现问题做肌肉蛋白SDS-PAGE电泳,跑出来的泳带模糊不清且有拖尾的现象,原本应该显示的泳带没有显示出来,或者显示出模糊的一块.只有一条或两条带比较清晰,其他的都模模糊糊.另 琼脂糖凝胶电泳双酶切为什么没有目的基因条带我用的10000的MARKER,我的重组质粒有6000多BP,质粒5300多BP,电泳后发现只有重组质粒的条带和切下来的质粒条带,在1000BP左右并没有发现我目的基因 DNA琼脂糖凝胶电泳图谱怎么分下?从右向左分别为 大肠杆菌质粒DNA电泳图谱、链霉菌总DNA电泳图谱、Marker.感觉好怪啊,质粒DNA一大坨,上面有一条非常浅的带,并不是三条带.而总DNA总共四条带, 质粒单酶切后电泳只有一条条带,位置比原质粒低一点,请问我这是切没切开啊 质粒大抽时,加入P2后菌体还未裂解充分就加入P3,抽提出的质粒是否有菌体污染呢?质粒大抽时,加入P2后菌体还未裂解充分就加入P3,抽提出的质粒除量少点外,OD值在正常范围内的,电泳后也在目 质粒大抽时,加入P2后菌体未裂解充分就加入P3,提出的质粒会不会有残留菌体污染呢?质粒大抽时,加入P2后菌体未裂解充分就加入P3,提出的质粒OD值在正常范围内,电泳也没有问题,但会不会有残 DNA梯度电泳为什么没有条带只有最前面一条亮带后面没有亮带,溴酚蓝是跑出来了 双酶切质粒后电泳 双酶切质粒pgl 6.24(5882bp)无共同buffer kPN I 2.5小时 bgl II 3.5小时 之后电泳 为什么出来1万多的带?跑的比原来质粒还有10000bp的marker还慢……怎么回事啊……求高人指点 提出来的RNA 电泳检测时没有条带 用的是1%琼脂糖电泳 质粒DNA酶切电泳图怎么分析(第二条带为质粒,第三条带为酶切片段,由于实验时没有PCR,所以只有两条带) 问个重组质粒的电泳图和重组质粒pcr产物的电泳图的基本问题很小白,我不懂重组质粒的电泳图是如何验证重组质粒成功构建了呢,因为跑出来的大小与重组质粒应有的大小一致?还有不明白重 质粒DNA 的电泳图谱为何有时只有一条带谱,有时又有2-3条带谱? 带质粒的细菌在EB培养基中培养后为什么会有不带质粒的细菌出现 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊?